如何判斷新生牛血清的性能好壞？

發(fā)布時(shí)間： 2024-10-14　　點(diǎn)擊次數(shù)： 237次

　　新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡(jiǎn)稱NBCS）是通過采集出生0-7天或0-30天內(nèi)的新生牛靜脈血，經(jīng)除菌過濾后制成的用于動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的生物試劑。其質(zhì)量好壞直接影響細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，因此判斷牛血清的性能至關(guān)重要。

　　以下是一些關(guān)鍵指標(biāo)和方法來(lái)判斷新生牛血清的性能：

　　總蛋白含量

　　定義：總蛋白是牛血清中的重要成分，在細(xì)胞培養(yǎng)中起著維持滲透壓、pH值緩沖、物質(zhì)運(yùn)輸和提供營(yíng)養(yǎng)等作用。

　　檢測(cè)方法：通過化學(xué)成分分析，測(cè)定血清中的總蛋白含量。一般來(lái)說，國(guó)產(chǎn)牛血清的總蛋白含量在3.7%到4.4%之間。

　　評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：總蛋白含量適中且穩(wěn)定，表明血清質(zhì)量好。如果總蛋白含量過高或過低，可能意味著血清摻假或處理不當(dāng)。

　　血紅蛋白含量

　　定義：血紅蛋白是評(píng)價(jià)牛血清生產(chǎn)工藝好壞的重要指標(biāo)。在采血、運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中，紅細(xì)胞可能會(huì)裂解釋放出血紅蛋白。

　　檢測(cè)方法：通常采用分光光度法來(lái)測(cè)定血紅蛋白含量。

　　評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：優(yōu)質(zhì)的新生牛血清中血紅蛋白含量應(yīng)盡可能低?！吨袊?guó)藥典》三部（2015版）要求血紅蛋白含量不高于200mg/L。血紅蛋白含量高可能導(dǎo)致細(xì)胞受損和下游純化難度增加。

　　內(nèi)毒素含量

　　定義：內(nèi)毒素是由革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁裂解釋放的毒素，不利于細(xì)胞生長(zhǎng)。

　　檢測(cè)方法：通過定量檢測(cè)內(nèi)毒素含量，通常以EU/ml為單位。

　　評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：內(nèi)毒素含量≤10EU/ml為特級(jí)，內(nèi)毒素含量＞10EU/ml且≤25EU/ml為優(yōu)級(jí)，內(nèi)毒素含量≥25EU/ml為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)。內(nèi)毒素含量越低，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)越有利。

　　外觀

　　顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色。優(yōu)質(zhì)進(jìn)口血清呈現(xiàn)淡黃或微紅色，而劣質(zhì)血清可能呈現(xiàn)橘紅色或鮮紅色。熱滅活或保存不當(dāng)?shù)难鍟?huì)呈現(xiàn)暗紅甚至咖啡色。

　　澄清度：進(jìn)口血清由于蛋白和脂類含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡；國(guó)產(chǎn)血清相對(duì)粘稠，顏色略深。

　　沉淀

　　觀察：進(jìn)口血清在過濾分裝前很少反復(fù)凍融，成品清澈。但隨著時(shí)間推移，血清中的纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。

　　評(píng)估：優(yōu)質(zhì)血清在生產(chǎn)后初期應(yīng)清澈無(wú)沉淀，長(zhǎng)時(shí)間存放后可能會(huì)有少量沉淀。

　　免疫球蛋白含量

　　定義：免疫球蛋白的含量可以反映采血時(shí)牛齡情況。胎牛血清不含IgM，IgG含量也較低。

　　檢測(cè)方法：通過免疫學(xué)方法測(cè)定IgG和IgM的含量。

　　評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：IgG含量遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)值，表明采血時(shí)牛齡較小，血清質(zhì)量較好。

　　微生物和病毒含量

　　定義：微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體及各類病原性病毒，這些微生物會(huì)影響血清質(zhì)量。

　　檢測(cè)方法：通過細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和多種病毒檢測(cè)來(lái)評(píng)估。

　　評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：出廠前經(jīng)過嚴(yán)格檢測(cè)，確保無(wú)致病變、無(wú)血吸附、多種病毒檢測(cè)陰性。

　　批間差

　　定義：不同批次血清中的微妙成分差異可能導(dǎo)致細(xì)胞適應(yīng)期延長(zhǎng)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

　　評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制篩選和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)，減少批間差異。

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如何判斷新生牛血清的性能好壞？